Von Beginn an ist Mittenwald Startort des jeantex BIKE Transalp Challenge von Mittenwald nach Riva am Gardasee, einer der härtestens Mountainbike-Marathons überhaupt. Radler finden viele ebene oder leicht ansteigende Radwege. Durchgehend beschildert ist der neue Isarradweg, der vom Isarursprung über Mittenwald bis München und weiter bis zur Donaumündung führt.
Es gibt Bike- und Radlshops, Reparaturservice und Verleihstationen in Mittenwald. Die Tourist-Information veranstaltet geführte Touren und hält entsprechendes Kartenmaterial bereit.
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